différents types de pcr

[shishiviolette]

Coucou la génétique
J'ai un peu de mal à comprendre la différence entre les différents types de pcr, (normal, rflp etc), ce qui fait que je tombe pas mal dans ces pièges dans les qcm
est ce que ce serait possible de me faire un petit récap si ça vous dérange pas ?
Merci d'avance

[Biomol'ka]

Coucouuu !

Il faut avoir ce schéma en tête :

Définition : La PCR sert à amplifier un fragment d'ADN en un très grand nombre de copies.

Tu as deux types de PCR :

La PCR dite "classique" utilisée dans le cadre d'une PCR-RFLP ou d'une PCR-Séquençage :
- PCR-RFLP : Pour la recherche d'une mutation ciblée connue et précise comme dans le cadre de l'achondroplasie où tu connais bien les 2 mutations impliquées. Dans ce cas, tu fais une simple PCR (avec mesure de la fluorescence au bout des 35-40 cycles), puis une digestion enzymatique (d'où le "RFLP") que tu vérifies ensuite par séquençage.
- PCR-Séquençage : Tu connais le gène impliqué dans ta maladie mais tu veux connaître la mutation précise (au niveau de la séquence nuclétotidique car plusieurs possibilités de mutations). Tu fais une PCR (toujours avec mesure de la fluorescence au bout des 35-40 cycles) puis un séquençage sanger. C'est le cas dans le syndrome de wolfram.

La PCR quantitative = RT-PCR (Real-Time PCR) = PCR en temps réel
Elle sert en plus d'amplifier à quantifier la quantité d'ADN. Elle est utilisée dans les maladies infectieuses pour déterminer les charges virales et pour quantifier le nombre de copies de virus. Elle est également utilisée pour déterminer l’expression d’un ARN. La mesure de la fluorescence se fait à la fin de l'élongation de chaque cycle PCR.

C'est bon pour toi ?

[shishiviolette]

C'est parfait merciiii !!