Élongation sequencage

[Guillaume83]

Bonjour j’ai vu que la température de l’élongation est de 60 degrés dans la roneo et pour la pcr c’est 72degres donc est ce qu’on doit retenir la température précise pour chaque technique ?
Psk en soit on utilise une taq dans les 2 cas donc ça devrait être exactement la même température et comme parfois la température exacte tombe en exam si on te dit 72 alors que dans le cours c’est 60…
Merci de ta réponse

[Stabilo'drey]

Bonchouuuur !!
Alors oui en effet la prof donne des températures différentes selon les techniques. Il faut que tu apprennes comme ça je suis désolé.
Par contre si tu veux je peux lui demandé pourquoi on a pas 2 fois la même température.

[Guillaume83]

Oui ce serait top que tu demandes
En plus avec notre 60 degrés au lieu de 72 on est plus proche de notre température d’hybridation que d’élongation alors c’est bizarre
Et en exam si le 60 degrés il tombe et que c’est 72 mais que 60 ça marche aussi psk elle correspond à la taq dans un autre cours tu vois c’est compliqué
Merci beaucoup 😊

[Stabilo'drey]

Coucou ! La prof a répondu a ta question, je te met sa réponse :

Dans la PCR l’élongation se fait à 72°C, alors que pour le séquençage l’élongation se fait à 60°C. Pouvez-vous nous expliquer pourquoi il y a cette différence de température ?

La différence provient juste des Taq DNA polymérase qui sont différentes. Elles ont des températures optimales différentes.

Est ce que c'est bon ?

[Guillaume83]

Merci beaucoup je vais en profiter pour allez les tcheker mais c’est beaucoup trop sympas de ta part
Ok donc c’est pas une erreur faut vraiment apprendre tel quel
Merci +++