Helloooo !
Les amorces servent uniquement à
commencer l'élongation. On besoin d'un petit morceau d'ADN complémentaire pour avoir une portion d'ADN double brin et que la TAQ polymérase vienne se fixer.
L'élongation s'arrête à la
fin du brin, que ce soit pour la PCR ou le séquençage, on met dans notre tube uniquement la
portion qui nous intéresse, on a pas besoin d'amorces pour arrêter l'élongation.
Maintenant pourquoi on a besoin de 2 amorces dans la PCR et d'1 seule dans le séquençage ?Dans la PCR, on souhaite
tout amplifier, on amplifie les
2 brins qui ont était séparé pendant la dénaturation.
On a donc besoin de
2 amorces différents, une pour le
brin sens, une autre pour le
brin reverse.
Dans le séquençage on amplifie
UNIQUEMENT le brin sens et
on ne veut pas amplifier le brin reverse.
Pour ensuite lire la séquence de nucléotide, il faut lire un seul brin et pas son brin complémentaire en même temps sinon ça fausse tout !
Donc on met
1 seule amorce pour amplifier seulement le brin sens.
Est ce que c'est bon pour toi maintenant ??