DM Carte de restriction

[paulineadnet]

Bonjour !

J'ai beaucoup de mal à comprendre les démarches pour répondre à ce type de qcm, j'ai mis en pj un qcm type du DM des cartes de restrictions que je n'arrive pas à faire, peux-tu m'aider s'il te plaît?

Merciii par avance

[TriPhosphatE]

Coucou pauline t'as bien fait de demander car c'est quelque chose qui tombe souvent à l'examen

On va le faire étape par étape, voici un schéma pour que tu suive en même temps:

1) lire l'énoncé et identifié les enzymes de restriction que l'on va utiliser. En l'occurrence ici c'est EcorI et MtbI

2) localiser l'endroit sur la carte où les enzymes coupent. Ici elles coupent en position 450, 1650 et 3400

3) identifier le nombre de fragments créés par les coupures. Ici y en a 3 donc on sait d'avance que le bon item aura 3 termes du type X + Y + Z. Là les 4 items ont 3 termes donc il faut aller plus loin

4) Calculer le nombre de paires de bases de chaque fragments. Pour ce faire il y a plusieurs règles à respecter :
- Ne JAMAIS calculer sur un fragment qui passe par le haut du plasmide (représenté en fuschia) donc ici pas le fragment représenté en bleu
- Pour calculer le nombre de paire de bases du 1er fragment tu soustrait les positions des enzymes de restriction situées aux extrémités de ce fragment. Exemple pour le brin jaune tu fais 3400 - 1650 = 1750. Donc le fragment jaune fait 1750 pb.
- Tu repètes cette étape précédente autant de fois qu'il y a de fragment ne passant pas sur le sommet. Ici donc on fait cette opération deux fois : un pour le jaune et un pour le vert. Ainsi le vert fait 1650 - 450 = 1200 pb.
-Pour trouver le nombre de paire de bases du dernier fragment (celui qui passe par le haut) tu additionnes le nombre de paire de bases de chaque fragment trouvé précédemment que tu soustrait au nombre total de paires de bases du plasmide indiqué au centre de celui-ci. Ici le plasmide fait 3700pb. Donc on fait 3700 - (1750 +1200) soit 3700 - 2950 ce qui fait 750pb.

Après cette étape tu sais donc que tu a un plasmide avec un fragment à 1750 pb, un autre à 1200 pb et un dernier à 750 pb. Donc l'item B est vrai.
Cependant c'est pas fini

5) Vérifier si les items demandent de compter l'insert. Ici les items C et D tiennent compte de l'insert. Il faut donc le rajouter dans le plasmide. Ici il est rajouté dans le fragment vert. Sachant que l'insert fait ici 300 pb il faut donc additionner 300 pb au fragment vert qui fait désormais 1200 + 300 = 1500 pb. Donc l'item C est vrai.

Bonne réponse : BC

[paulineadnet]

Merci beauuucoup l'explication est très claire! J'ai compris !