Qcm 8 D

[strawhat]

Hello hello !!

Par rapport à cet item, au concours l'insert de trouvait exactement au milieu du coup c'etait facile de raisonner, mais ici j'ai vraiment pas compris comment on faisait quand il était à l'extrémité comme ça... (très bon sujet au passage, on sent la fibre nucléosique à travers ces 8 qcms)

Merci pour tout!!! ?

[tamha06]

je voudrais bien une explication également svp.

Et merciiiii pour ce sujet

[Nom_de_Zeus!]

Hey !

C'est exactement le même concept si vous avez compris comment ça fonctionne rien ne devrait vous perturber

Vous savez qu'en cas de mutation, l'insert de 400 pb est clivé en deux fragments de 200 pb (mais si les deux fragments ont une taille différente, par exemple 250 et 150 c'est toujours la même chose)
Vous savez aussi que cet insert est intégré au niveau de la position 600 : ça veut dire qu'on ouvre le plasmide en 600 pour y rajouter 400 pb, du coup le centre de l'insert qui correspond à la position de la mutation se situe théoriquement au niveau de cette position 600

Je m'explique : vous ouvrez un cercle, vous rajoutez un bout de 400 pb en position 600
Or, vous savez que la mutation clive ce bout de 400 pb en deux bouts de 200 pb : le site de la mutation est donc forcément "au milieu" et vous vous retrouvez avec 200p b à gauche du point de coupure, et 200 pb à droite de ce même point de coupure

La première étape est d'identifier où je coupe sur l'insert, et quelle taille font les fragments qui se retrouvent à gauche et à droite de ce point de coupure !

Ensuite on regarde où on est par rapport aux bouts générés quand on coupe le plasmide : dans ce cas on est à une extrémité

Faites comme si l'insert n'était pas coupé dans un premier temps, ensuite regardez en quelle position il est inséré et combien de pb se retrouvent à gauche et à droite du site de coupure, qu'il soit situé au centre ou non de l'insert ça ne change rien du tout (pour vous aider, imaginez que le point de coupure sur l'insert, qu'il soit au milieu ou non, est toujours aligné au niveau de la position du plasmide où l'insert est intégré, si vous coupez un insert de 400 pb en 250 et 150 pb, et que vous intégrez l'insert en position 600, alors la position 600 se retrouvera "au niveau" de la jonction entre les fragments de 250 et 150 pb de l'insert ! Autrement dit vous aurez 250 pb d'un côté de cette position 600 et 150 de l'autre côté)

Dans cet exemple on se retrouve avec 200 pb de part et d'autre du site de coupure

On va recouper le bout du plasmide généré au niveau de la position 600, donc pour reprendre cet exemple vous coupez initialement en 1700 et en 500, ce qui vous fait un bout de 1200 pb (on ne prend pas en compte l'insert pour l'instant)

On recoupe en 600 (où l'insert est intégré), et on génère deux fragments : un de 1700 - 600 = 1100 pb et un de 600 - 500 = 100 pb (on vérifie au passage que 1100 + 100 = 1200 pb)

Vous pouvez maintenant rajouter l'insert muté qui va être découpé en deux fragments de 200 pb que vous allez répartir de part et d'autre de la position 600, autrement dit on ajoute 200 pb à chacun des deux bouts générés : on a donc 100 + 200 = 300 pb et 1100 + 200 = 1300 pb

C'est mieux ?

[strawhat]

oh putain c'est génialissime, merci c'est tout bon pour moi !!!

[tamha06]

Wooow ok merci beaucoup c'est plus clair