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[Résolu] Annales QCM 8-D 2016-2017

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[Résolu] Annales QCM 8-D 2016-2017

Messagepar jb.n » 01 Mai 2018, 16:29

Salut! :) Je capte pas trop la correction de cet item compté juste "La digestion par Xho1 permettra de différencier les ADN recombinants possédant l'insert avec la mutation de ceux portant l'insert sans la mutation" étant donné que la mutation ne modifie pas la taille de l'insert mais crée juste un site de restriction pour l'enzyme EcoR1 divisant l'insert en 50+50.... Du coup pour démontrer la présence de la mutation il faudrait l'enzyme EcoR1 et une digestion par Xho1 nous montrerait juste si l'insert est bien intégré au vecteur ou pas..... @@
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Re: Annales QCM 8-D 2016-2017

Messagepar Nom_de_Zeus! » 01 Mai 2018, 18:48

Hey ! :D

Alors non déjà cet item est bien compté faux dans la correction de notre DM Annales correspondant, il n'est pas dit qu'on veut savoir si l'insert a été intégré ou pas ça on s'en fout, on part du principe qu'il a été incorporé dans le plasmide, ce qu'on veut savoir c'est si cet insert dont on suppose qu'il a été intégré est muté ou pas !

La mutation va créer un site de restriction supplémentaire pour EcoR I, du coup lorsqu'on utilise cette enzyme, si l'insert est muté on génèrera des fragments différents (un fragment va être redécoupé en deux plus petits)

Lors d'une digestion par EcoR I, l'électrophorèse obtenue sera donc bien différente selon que l'insert est muté ou non (car l'enzyme coupera ou pas une fois de plus)

En revanche, si on utilise l'enzyme Xho I, que l'insert soit muté ou non ne changera rien car de toute façon on ne créé pas de site de restriction supplémentaire pour Xho I, du coup lors d'une digestion par Xho I, l'électrophorèse obtenue sera strictement identique selon que l'insert est muté ou non, on génèrera exactement les mêmes fragments
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Re: Annales QCM 8-D 2016-2017

Messagepar jb.n » 11 Mai 2018, 21:17

Meeerci (désolé un peu tard mais j'avais zappé de répondre :) )
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