Ligation du vecteur et de l'insert

[Lucastérion]

Salut !
Je n'ai pas bien compris à quoi va servir l'étape de dephosphorylation qui permet de générer des extrémités franches lors de l'action de la T4 DNA Ligase. En gros, en quoi il est nécessaire de générer des extrémités franches lors de la ligation?

(J'espère que c'est clair )

Merci d'avance

[Niavlys]

Salut

Alors il n'est pas forcément nécessaire d'avoir des extrémités franches pour que l'insert se lie au vecteur, elles peuvent être aussi cohésives.

- La déphosphorylation va être nécessaire car lorsque ton vecteur possède 2 extrémités franches, il arrive qu'il se referme sur lui même, la déphosphorylation empêchera alors ce phénomène d'arriver

C'est plus clair ? Je te rajoute cette diapo tiré de notre cour de la tut rentrée pour mieux comprendre

Bonne soirée

[Lucastérion]

J'ai compris merci