"les produits PCR étant mélangés"

[Revenge]

Salut!

Alors j'ai un petit soucis en ue11 concernant ce passage, on a un gosse qu'a Wolfram, on a trouvé une SN nucléotidique chez le père okay, mais on a rien trouvé chez la mère au séquençage des Exons, pourtant y'a un truc qui déconne DONC on va reverse un ARNmature en ADNc pour obtenir un hétéroduplexe c'est tou bon jusque là ..

Donc, on a récupéré QU'UN ARNm, on la reverse, l'ADNc obtenu on l'a amplifié, très bien, mais comment j'en arrive a avoir des séquences de deux allèles si de base j'ai reverse qu'un ARNm issus d'un seul des deux allèles

Mon problème vient d'une incompréhension de la biomol S1 je pense.. En particulier le contenu de l'ARNm, je croyais que un ARNm allé refléter l'expression d'un l'allèle, donc théoriquement il faudrait qu'on ai pris pleins d'ARNm pour en avoir des papas et des mamans, les reverses les amplifier et là je comprendrais qu'on est un sac d'amplicons papa ou maman mélangées, c'est ça ? Si c'est ça y'a plus de soucis ahah
Merci :--)

[Nom_de_Zeus!]

Hey !

Oui c'est ça tu vas utiliser la transcriptase inverse sur plusieurs ARNm puisque de toute façon sans les séquencer tu ne peux pas savoir si l'ARNm que tu as est d'origine maternelle ou paternelle, tu en récupères donc plusieurs et selon toute probabilité il y en aura des deux origines

Ne te prends pas trop la tête avec ce genre de raisonnement, retiens qu'on utilise de la transcriptase inverse à partir de l'ARNm et que dans le cas d'un variant d'épissage l'ADNc est plus lourd que dans le cas d'une mutation ponctuelle c'est surtout ça le plus important !

[Revenge]

Nan mais vu que c'est n'est pas dit j'ai cru qu'on utilisait un unique ARNm et du coup la suite était aberrante ahah, merci pour la confirmation :--)